激光共聚焦显微镜（LSCM）是一种分子细胞生物学分析仪器，它使用计算机，激光和图像处理技术从生物样品中获取三维数据。它主要用于观察特定分子和离子的生物细胞结构和生物学变化，定量分析和实时定量测定。

一、激光共聚焦显微镜的优点

激光共聚焦显微镜是使用激光作为光源，在标记相应的荧光探针之后，逐点扫描样品，并逐层获得二维光学截面图像，具有“细胞CT”的功能。并且可以通过计算机3D重建软件支持。获取三维图像并以任意角度旋转以观察细胞，组织三维形状和空间关系。

可以无损伤地观察活细胞和组织，动态测量活细胞的生理信息，如细胞内Ca离子浓度和pH值。

可用于细胞膜流动性，细胞间通讯，细胞融合，细胞骨架弹性测量等，可作为“光刀”完成细胞内“手术”。该技术可以对活细胞和组织进行原位动态定量观察和测量。

与传统的光学显微镜相比，激光共聚焦显微镜具有更高的分辨率，可以在形成清晰的三维图像的同时观察到多种荧光。

二、激光共聚焦显微镜的原理

传统的光学显微镜使用场源。样品上每个点的图像受到来自相邻点的衍射或散射光的干扰。激光共聚焦显微镜使用激光束照射针孔，以形成样品焦平面中每个点的点源。

扫描时，样品上的被照射点在探针针孔处成像，探针针孔后面的点倍增管（PMT）或冷耦合装置（cCCD）在计算机监视器屏幕上逐点或逐行接收。

快速接收在其上形成荧光图像。照明针孔和检测针孔相对于物镜的焦平面共轭，焦平面上的点同时聚焦在照明针孔和发射针孔上。

焦平面外的点不是共焦点由此获得的探针针孔的图像它是样品的光学截面，克服了普通显微镜图像模糊的缺点。

激光共聚焦显微镜是一组使用激光作为光源的观察，分析和输出系统。在传统的光学显微镜的基础上使用共轭聚焦原理和装置，并通过计算机观察数字图像处理。

荧光探针被紫外或可见光激发，以使光学成像的分辨率提高30％至40％，从而获得细胞或组织中精细结构的荧光图像，并观察亚细胞水平的生理信号和细胞形态的变化。在形态学，分子生物学，神经科学，药理学，遗传学等领域的新一代研究工具。

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