代理岛津气相,液相色谱,离子色谱仪

7*12小时服务热线(业务咨询):400-099-6011

行业新闻

首页 > 新闻中心 > 行业新闻 > 平滑肌细胞划痕愈合研究

平滑肌细胞划痕愈合研究

提供 来源:徕卡-化工仪器网      日期:2022年12月05日
分享到:

可靠的长时间活细胞成像

本文主要讨论如何使用专门配置的徕卡倒置显微镜和台式细胞培养箱轻松、可靠地研究多孔板中培养的平滑肌细胞(SMC)的划痕愈合情况。血管受损后影响SMC增殖和迁移的信号转导情况在医学研究中有重要意义。由于SMC遍布全身,所以对其迁移情况的研究也有助于癌症和损伤的治疗。

 

引言

研究人员主要研究血管损伤后及动脉粥样硬化进展过程中控制SMC的增殖和迁移的机制和细胞信号转导情况[1,2]。这些平滑肌细胞和脉管系统遍及全身各部位的每一种组织内,包括但不限于肺部、肠道和大脑。已发表的研究报告已经证实了SMC的增殖和迁移在癌症、眼部损伤以及动脉粥样硬化进展过程相关[1,2]。本文主要讲述如何通过徕卡倒置显微镜和台式细胞培养箱以更加有效、可靠的方式研究多孔板中培养的SMC相关的划痕愈合情况。

 

挑战

在融合的单层细胞形成划痕时,须随时监测划痕的再生和“愈合"情况,以测定其恢复能力[3]。这就需要一个可靠的成像解决方案,该解决方案应能:1)让细胞存活更长时间,及2)即使在多孔板内成像,也可在成像过程中持续将焦点放在细胞上。

 

方法

在此研究中,多孔板内贴壁培养的融合单层SMC生成“划痕"。其是由p200移液器吸头造成的。为研究划痕愈合情况,紧接着使用物镜为10x/0.32 NA(数值孔径)的DMi8 倒置显微镜在相差模式下观察细胞生长情况19个小时以上。使用了量子载物台和台式培养箱来培养细胞[4]。载物定位的可再现性功能确保在拍摄多个位置后不会丢失观察位置。自适应焦点控制(AFC)可使物镜“锁定"样本从而保持焦点,因为AFC会主动检查样本和物镜的距离,随时且随板孔的变化保持焦点。每20分钟拍摄一次图像,共有114个时间点。整个过程对3个孔中的划痕区域进行了观察。采集图像后,使用Leica 2D分析软件对其进行处理,计算随着时间推移划痕面积发生的变化。整个实验包括对照共检测了4个不同孔。

 

结果

图1中,单个位置显示为19小时采集的代表性时间序列,并显示了典型的划痕愈合进展情况。面积随时间的变化分析结果如图1的下半部分所示。图2所示为绘制的4个孔中3个孔随时间变化的曲线,说明划痕愈合的进展情况,即单层细胞在划痕中的再生。

 

图1:划痕愈合过程中的SMC图像。A-E所示为位置1在A) 0小时、B) 4小时40分、C) 9小时20分、D) 14小时、E) 18小时40分时未处理图像裁剪部分。A’-E’所示为计算划痕愈合率时处理的相应面积,其中黄线表示细胞与开放空间之间的边界。比例尺为200 um。图片由弗吉尼亚大学科学家Laura S. Shankman博士提供。

图2:划痕面积随时间变化的曲线说明单层细胞随着时间的推移的恢复情况。在3个单独的孔中监测划痕恢复情况,并将此标记为位置1至3B。位置3A和3B处于同一孔中,但是同一划痕的不同区域。

结论

本研究的结果表明,使用专门配有量子载物台、自适应焦点控制(AFC)和台式培养箱的DMi8 倒置显微镜,可轻松对多孔板中培养的SMC的划痕愈合的过程进行研究。

 

 

声明:文章来源于徕卡化工仪器网,旨在分享若涉及版权问题,请及时与我司联系,我们将快速处理。

最新动态

  • 岛津鼎力支持“2021~2022年中药质量与安全风险防控论坛”

    2023年3月24~26日,由中国中药协会中药质量与委员会主办的“2021~2022年中药质量与安全风险防控论坛”在北京会议顺利召开,来自药品生产企业、药品检验机构及科研单位等700余人参加了本次会议。

    2023年03月29日
  • Nexis GC-2030报“CAR AFC无法正常控制”的处理方法

    我们在使用Nexis GC-2030中,有时会遇到CAR1(或CAR2)AFC无法正常控制的错误。下面针对此问题报错的原因以及相关处理方法进行说明,使客户朋友们能够更好地使用。

    2023年07月11日
  • 干货分享丨mRNA疫苗关键质量控制解决方案

    近期,美国食品药品监督管理局(FDA)授予黑色素瘤mRNA疫苗“突破性疗法”的认定,这是全球获此认证的mRNA肿瘤疫苗。国内新型冠状病毒mRNA疫苗也于近期纳入紧急使用。mRNA疫苗是目前炙手可热的医药领域之一,被誉为“全能钥匙”的mRNA疫苗,理论上能够表达任何蛋白,在疫苗、肿瘤治疗、先天性代谢疾病等领域都有着很广阔的前景。但作为一类全新的疫苗,其质量控制仍处于探索阶段,一起来看看岛津新的应用研究成果!

    2023年06月08日
  • 岛津与全球的合作伙伴同在!“泰国科技立国”之路

    泰国国立科技发展署(NSTDA)的目标是激活国内产业的研发,建设对国内外科研人员具有吸引力的国家,即科技立国。

    2023年04月10日
  • 售前咨询 售后咨询 评“香”论“质”丨岛津方案带您揭开人造肉的神秘面纱

    岛津推出《人造肉检测整体解决方案》,内容涵盖感官与营养、食品添加剂、污染物及有毒有害成分等多个方面,涉及试验机、GCMSMS、LCMSMS及ICPMS等相关检测方法,带您一起揭开人造肉的神秘面纱。

    2023年04月14日

BAHENS仪器微信公众号

Copyright © 2010 BaHens(CHINA) INSTRUMENT CO.,LTD 沪ICP备10009833号-12
网站技术支持: 上海高端网站建设 与 定制网站设计 服务商-PAIKY