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激光共聚焦显微镜是由哪四个部分组成的?

提供 来源:      日期:2019年12月03日
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激光共聚焦显微镜是1980年代开发的具有划时代意义的高科技新产品,它是当今世界上细胞生物学分析仪器。激光共聚焦显微镜使用激光作为光源,使用基于传统光学显微镜的共轭聚焦原理和装置。

选择针孔并收集PMT,并对其观察到的物体进行数字图像分析处理系统软件。与传统的光学显微镜相比,它具有更高的分辨率,同时观察多个荧光以及形成清晰的三维图像的优点。因此,自从引入以来,它已被广泛用于生物学研究领域。

一、显微镜光学系统

显微镜是激光共聚焦显微镜的主要组件,它与系统的成像质量有关。具有无限光学系统的显微镜的光路可以轻松地将光学选件插入其中,而不会影响成像质量和测量精度。

物镜应选择大数值孔径的平场复消色差物镜,这有利于荧光的采集和成像的清晰度。物镜组的转换,滤色镜组的选择,镜台移动的调整以及焦平面的存储锁定应由计算机自动控制。

二、扫描装置

激光共聚焦显微镜使用的扫描设备通常是生物领域中的镜像扫描。由于旋转镜仅需要偏转小角度即可覆盖较大的扫描范围,因此大大提高了图像采集速度。 512×512的图片每秒可以达到4帧以上,这有助于那些短寿命的离子进行荧光测量。扫描系统的工作程序由计算机自动控制。

 

三、激光光源

激光共聚焦显微镜使用的激光光源是单激光和多激光系统。多激光器系统在可见光范围内使用多线氩离子激光器,发出457 nm,488 nm和514 nm的蓝绿色光,氦氖绿色激光器提供543 nm波长的绿光,氦氖红激光器发出的红光波长为633 nm,因此新的405nm半导体激光器的问世可以提供近紫外光,但它们体积小,价格便宜且易于维护。

四、检测系统

激光共聚焦显微镜是一个多通道荧光采集系统。它通常具有三个荧光通道和一个透射光通道,可以将其升级为四个荧光通道。它可以对物体执行多线激光激发。从样品发出荧光的检测器是具有高灵敏度的光电倍增管。 Tube PMT配备了高速12位A / D转换器,可以进行光子计数。

在PMT的前面设置了一个针孔,该针孔的大小可以通过计算机软件进行调整。可以在光路上自动切换的滤色镜组可以满足不同测量的需求。在通过光栅或棱镜分离光束之后,还需要设置光谱扫描功能。

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