激光共聚焦显微镜(CLSM)是一种现代生物医学成像仪器。它配备有基于荧光显微镜成像的激光扫描装置,并使用紫外线或可见光激发荧光探针。
由计算机执行图像处理,以获取细胞或组织内部微结构的荧光图像,并在亚细胞水平上观察生理信号(例如Ca2 +,pH,膜电位和细胞形态)的变化。
激光共聚焦显微镜使用激光作为扫描光源、逐点、逐行、快速一对一扫描和成像。扫描的激光和荧光收集物共享同一物镜。物镜的焦点是扫描激光的焦点。
它也是瞬时成像对象点。该系统一次聚焦,并且扫描于样品的一个平面。当聚焦深度不同时,可以获得样品的不同深度水平的图像。这些图像信息存储在计算机中。
通过计算机分析和模拟,可以显示细胞样品的三维结构。在配置中,除了普通光学显微镜的基本结构外,激光共聚焦显微镜还包括激光光源、扫描设备、检测器、计算机系统(包括数据采集、处理、转换、应用软件)、以及图片。
输出设备,光学器件和共焦系统[2]。由于该仪器具有高分辨率,高灵敏度,“光学切片”,三维重建和动态分析等优点,为基础医学和临床医学的研究提供了有效的手段。
另外,激光共聚焦显微镜在荧光样品的观察中具有明显的优势。只要可以用荧光探针标记样品即可。激光共聚焦显微镜可用于观察细胞形态,以及细胞内生化成分的定量分析,光密度统计和细胞形态测量。
使用聚焦稳定系统,可以长时间观察活细胞。激光共聚焦显微镜作为一种新的实验方法和强大的研究工具,为我们解决过去研究工作无法解决的一些技术问题创造了条件。因此必将得到更广泛的应用。随着新软件的不断开发以及各个学科的不断发展和相互渗透,相信它将具有更广阔的发展前景。
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